Die magnetische Exposition mit Samarium-Kobalt (SmCO5) erhöhte die Proliferation und Stammzellenbildung menschlicher mesenchymaler Nabelschnurstammzellen (hUC).

Wissenschaftliche Berichte Band 12, Artikelnummer: 8904 (2022) Diesen Artikel zitieren

1089 Zugriffe

2 Zitate

4 Altmetrisch

Details zu den Metriken

Trotz der umfangreichen Berichte über die potenzielle Gefahr von Magnetfeld-Expositionen (MF) für Menschen wird gleichzeitig auch über die verbesserte Proliferationseigenschaft von Stammzellen bei optimaler Exposition berichtet. Die Wirkung auf mesenchymale Stammzellen (MSCs) ist jedoch weiterhin unbekannt. Daher wollten wir die Auswirkungen von induzierter statischer MF (SMF) auf aus der Nabelschnur stammende menschliche mesenchymale Stammzellen (hUC-MSCs) unter Verwendung von Samarium-Kobalt (SmCO5) untersuchen. Bei Passage 3 zeigten hUC-MSCs (1 × 104), die durch direkte Exposition (DE) 21,6 mT SMF ausgesetzt wurden, in den Wachstumskinetik-Assays eine signifikant höhere Zellzahl (p < 0,05) mit der kürzesten Populationsverdopplungszeit im Vergleich zur indirekten Exposition und Negativkontrolle. Die DE-Gruppe wurde in den Zellzyklus mit erhöhter S-Phase (55,18 ± 1,38 %) und G2/M-Phase (21,75 ± 1,38 %) im Vergleich zur NC-Gruppe [S-Phase (13,54 ± 2,73 %)“ aufgenommen; G2/M-Phase (8,36 ± 0,28 %)]. Obwohl keine signifikanten Veränderungen im Immunphänotyp beobachtet wurden, zeigte die DE-Gruppe eine erhöhte Expression von Pluripotenz-assoziierten Markern (OCT4, SOX2, NANOG und REX1). Diese Ergebnisse legen nahe, dass die MFs möglicherweise die Proliferation von MSCs induzieren könnten, ein vielversprechender Ansatz zur Förderung der Stammzellvermehrung für die klinische Therapie und Forschung, ohne die Stammzelleigenschaften von hUC-MSCs zu beeinträchtigen.

In den letzten Jahren konnten wir einen erheblichen Durchbruch in unserem Verständnis der Biologie menschlicher adulter Stammzellen verzeichnen, der sich in einem Anstieg der therapeutischen Nutzung nach verbesserter klinischer Wirksamkeit widerspiegelte. Von der zellbasierten Therapie1,2 über die Entwicklung biokünstlicher Organe3,4 und Wundgewebereparatur durch schnelle Geweberegeneration5,6,7 bis hin zur Behandlung verschiedener Krebsarten8,9 hat die Einführung menschlicher adulter Stammzellen durch Stammzelltransplantation zugenommen Er erfreute sich großer Beliebtheit, da es trotz seiner hohen therapeutischen Wirksamkeit nur ein geringes Risiko einer Abstoßung durch den Wirt und Nebenwirkungen aufweist.

Mesenchymale Stammzellen (MSCs), die im Knochenmark (BM) produziert werden, gelten als das am häufigsten und am längsten genutzte adulte Ausgangsgewebe für menschliche MSCs. Eine weitere Quelle „erwachsener“ MSCs im Erwachsenenalter sind Nabelschnurgewebe und Plazenta, die bei der Geburt häufig weggeworfen wurden10. Sie verfügen über hohe Selbsterneuerungseigenschaften und ein großes Potenzial zur Differenzierung11. Es wurde gezeigt, dass MSCs Zellen mesodermaler Abstammungslinien wie Knochen, Fett, Knorpel, Sehnen und Skelettmuskeln hervorbringen können12,13,14. Mehrere Berichte haben gezeigt, dass MSCs potenziell auch in verschiedene nicht-mesodermale Gewebe differenzieren, darunter Pankreas-Inselzellen15, Herzmuskelzellen16, Hepatozyten17 und Nervenzellen18. Im Vergleich zu anderen gewebespezifischen adulten Stammzellen sind MSCs ein bevorzugtes Therapeutikum, da sie sich gezielt an die Verletzungsstelle ansiedeln und sich in viele verschiedene mesenchymale und parenchymale Zelltypen differenzieren können19. MSCs verfügen außerdem über einzigartige reparative und immunsuppressive Eigenschaften, da sie große Mengen an proangiogenen, entzündungshemmenden und antiapoptotischen Zytokinen/Faktoren sezernieren, die für die Induktion der Geweberegeneration, Transplantationstoleranz und die Kontrolle der Autoimmunität verantwortlich sein können20,21. Aufgrund der immunprivilegierten Eigenschaften von MSCs, die es ihnen ermöglichen, der Immunantwort des Wirts zu entgehen, bleibt die intravaskuläre Therapie mit der Intervention von MSCs ein klinisches Verfahren mit geringem Risiko. Weitere Studien könnten durchgeführt werden, um die optimale Dosierung und Verabreichungsmethode für MSCs zu bewerten, da dieser Faktor zusätzlich zu anderen prädisponierenden Faktoren, die die Immunantwort des Wirts betreffen, eine wichtige Rolle bei der Steuerung des endgültigen klinischen Ergebnisses der Therapie spielen könnte.

Das therapeutisch potenzielle MSCs kann jedoch nur genutzt werden, indem die optimalen Bedingungen ermittelt werden, die erforderlich sind, um ihre Proliferation und kontinuierliche Vermehrung für Forschungs- und Therapiezwecke problemlos zu stimulieren22,23,24,25. Das Nabelschnurgewebe stellt eine begrenzte Quelle frisch isolierter Zellen dar, und obwohl Studien darauf hindeuten, dass menschliche Nabelschnur-MSCs (hUC-MSCs) im Vergleich zu MSCs aus Knochenmark oder Fettgewebe eine höhere Proliferationskapazität aufweisen26,27, besteht ein Bedarf an weiteren Zellen In-vitro-Expansion in großem Maßstab durchführen, ohne ihre Stammzellen- und Differenzierungsfähigkeiten zu verändern. Die Herausforderung besteht daher darin, einen optimalen Kulturzustand zu bestimmen, der die starke Ausbreitung von hUC-MSCs begünstigen kann, um den klinischen Bedarf zu decken.

Im Allgemeinen sind Menschen und andere Lebewesen auf natürliche Weise dem MF der Erde ausgesetzt, der nicht schädlich ist, sowie anderen Quellen harmloser MF, die aus magnetisierten Materialien, sogenannten Permanentmagneten, gewonnen werden können. Der Schlüssel zum Verständnis der Dichotomie zwischen schädlichen und harmlosen Formen von MF liegt in der Klassifizierung von MF anhand ihrer Quellen. Es gibt grundsätzlich zwei Arten von MFs, nämlich endogene und exogene Felder. Endogene Felder sind jene MFs, die im Körper produziert werden. Diese Art von MF tritt an verschiedenen elektrisch erregbaren Organen wie dem Herzen28,29,30, dem Gehirn31,32 und dem Auge33 auf. Die Studie zeigte auch, dass MFs die Leistung des Bewegungsapparates beeinflussten34. Andererseits sind exogene Felder MFs, die von Quellen außerhalb des Körpers erzeugt werden, und können als natürliche exogene Felder wie das Erdmagnetfeld (z. B. Samarium-Kobalt (SmCo5) oder Neodym-Ferum-Bor (NdFeB)) oder künstliche exogene Felder (Mensch) klassifiziert werden -hergestellte) MFs wie Stromleitungen, Transformatoren, Geräte, Funksender und medizinische Geräte35,36. Künstliche exogene MFs wurden von vielen Forschern identifiziert und die Form von MF identifiziert, die bei längerer oder häufiger Exposition schwerwiegende schädliche und gefährliche Auswirkungen auf Menschen und andere Lebewesen hat. Die häufige Exposition von Menschen gegenüber MF hat zu ernsthaften gesundheitlichen Bedenken geführt, da MF mit einigen medizinischen Komplikationen in Verbindung gebracht wurde. Mehrere Arten von Krebs37, Tumoren38, Glioblastomen39,40 und Leukämie41 wurden mit MF-Exposition in Verbindung gebracht. Da Menschen ständig dem Risiko ausgesetzt sind, schädlichen Formen von MFs durch alltägliche Aktivitäten am Arbeitsplatz, zu Hause, in U-Bahnen und anderen öffentlichen Orten ausgesetzt zu sein, haben sich Forscher mehr auf die Erforschung der schädlichen Auswirkungen von MFs konzentriert und diese entwickelt Techniken zur Erzeugung und Manipulation künstlicher exogener MFs, die diese täglichen Expositionen nachahmen, wie von Zanella35 berichtet. Interessanterweise kam eine Studie zu dem Schluss, dass eine optimale MF-Exposition über einen bestimmten kurzen Zeitraum überraschenderweise das Zellwachstum erheblich fördern könnte. Seitdem wurden zahlreiche Studien durchgeführt, in denen über37 positive Auswirkungen der MF-Exposition berichtet wurden, wie z. B. eine beschleunigte Heilung von Knochenbrüchen und die Verhinderung von Osteoporose42,43,44. Dementsprechend zielte unsere Studie darauf ab, den möglichen Einfluss eines induzierten statischen Magnetfelds (SMF) auf die Proliferationstendenzen menschlicher mesenchymaler Stammzellen aus der Nabelschnur unter Verwendung von SmCo5 zu untersuchen. SmCo5, dessen Magnetstärke nach dem NdFeB-Magneten die zweitgrößte ist, wurde in diesem Experiment als Magnetquelle ausgewählt, da es eine starke permanente Momentmagnetisierung aufweist und gegenüber dem Einfluss der Entmagnetisierung stabil ist. Es eignet sich auch für Experimente bei relativ hohen Temperaturen und ist rostbeständig, sodass keine Oberflächenbehandlung wie Beschichten oder Versiegeln erforderlich ist45,46. In dieser Studie wurde ein kontrollierbares Modell von SmCo5 als Quelle von MF entwickelt, das eine Simulation dieser Langzeiteffekte innerhalb relativ kurzer Zeit liefert. Das Ziel der vorliegenden Studie besteht darin, das optimale Kultursystem zu finden, indem die Auswirkungen der Exposition gegenüber SMF SmCo5 auf die Proliferation, Wachstumsrate und Genexpression von hUC-MSCs untersucht werden, mit dem Ziel, die MF-Exposition als alternative Technik zur Steigerung der Proliferation zu identifizieren Kapazität von MSCs, ohne die Eigenschaften von MSC zu verändern. Hierfür liefern wir eine wesentliche Grundlage für zukünftige SMF SmCo5-In-vitro-Experimente.

Die Beobachtung der Zellmorphologie wurde an hUC-MSCs der Passage 3 aufgezeichnet, die vom Tag 0 bis zum Tag 10 kultiviert wurden, wie in Abb. 1 dargestellt. Für beide Testgruppen (DE und IE) sowie die Kontrollgruppe (NC) waren adhärente Zellen vorhanden am Tag 2 beobachtet, wobei die Zellen die längliche fibroblastenartige Spindelform beibehielten, ein Merkmal gesunder MSCs. Obwohl die spindelförmige Morphologie in beiden Gruppen bis zum 10. Tag erhalten blieb, gab es deutliche Unterschiede in der Zeit, die benötigt wurde, um 100 % Konfluenz zu erreichen. Während die DE-Gruppe am achten Tag der Kultur eine Konfluenz von 100 % erreichte, lag die Zellkonfluenz in den IE- und NC-Gruppen bei etwa 80 %. Die Konfluenz blieb jedoch in der IE-Gruppe unverändert, verbesserte sich jedoch in der NC-Gruppe nach der Kultivierung bis zum 10. Tag deutlich (Abb. 1).

Morphologische Beobachtungen der hUC-MSCs. Beobachtung der Zellmorphologie der Passage 3 hUC-MSCs in den DE-, IE- und NC-Gruppen. Alle Zellen zeigten die charakteristische MSC-Fibroblasten-ähnliche Spindelform, wobei die DE-Gruppe am 8. Tag eine 100 %ige Konfluenz erreichte, während die IE-Gruppe selbst nach dem 10. Tag die geringste Konfluenz aufwies. Die NC-Gruppe erreichte am 10. Tag eine 100 %ige Konfluenz. Alle mikroskopischen Aufnahmen waren Aufgenommen mit dem Umkehrmikroskop CKX41 (Olympus, Japan) mit 100-facher Vergrößerung.

Die aus der Wachstumskinetik erhaltenen Ergebnisse zeigten, dass die Zellen in der Test- und Kontrollgruppe ein ähnliches Wachstumsmuster zeigten, das mit der Verzögerungsphase begann, gefolgt von der Phase des exponentiellen Wachstums und endete in der stationären Phase, Abb. 2a. Obwohl die Verzögerungsphase bis zum 4. Tag andauerte und die exponentielle Phase am 10. Tag in den DE-, IE- und NC-Gruppen ihren Höhepunkt erreichte, gab es im Vergleich zur NC-Gruppe einen signifikanten Anstieg der Zellzahl in der DE-Gruppe (3,13 × 104 ± 0,11) ( 2,66 × 104 ± 0,21 Zellen). In der IE-Gruppe wurde im Vergleich zur NC eine signifikante Abnahme der Zellzahl beobachtet (1,47 × 104 ± 0,15 Zellen). Allerdings gab es am 10. Tag, an dem die exponentielle Phase ihren Höhepunkt erreichte, keinen signifikanten Unterschied zwischen der DE- und der NC-Gruppe, während in der IE-Gruppe ein signifikanter Rückgang der Zellzahl beobachtet wurde (d. h. IE [9,42 × 104 ± 0,56 Zellen] gegenüber NC [ 12,4 × 104 ± 0,55 Zellen]), wie in Abb. 2b gezeigt. Es wurde auch beobachtet, dass die Zellen in beiden Testgruppen sowie in der Kontrolle beim Erreichen des Höhepunkts der exponentiellen Phase einen steilen Wachstumsrückgang erlebten (Abb. 2a) und nicht die Plateauphase, wie in der stationären Wachstumsphase erwartet Kinetik. In der Analyse der Populationsverdopplungszeit (PDT), die an den hUC-MSCs von Passage 1 bis Passage 6 durchgeführt wurde, gab es eine Abnahme der PDT, als sich die Zelle bis Passage 4 ausdehnte, und erreichte danach bis Passage 6 ein Plateau. Interessanterweise war die PDT von Die Anzahl der Zellen in der IE-Gruppe war in den Passagen 1 bis 6 höher im Vergleich zu denen der DE- und NC-Gruppen, mit einem statistisch signifikanten Anstieg (p < 0,05) in der IE-Gruppe im Vergleich zur NC, der bei Passage 3 aufgezeichnet wurde. Es gibt jedoch keinen signifikanten Unterschied zwischen den PDT von Zellen in der DE-Gruppe und denen der NC-Gruppe (Abb. 2c).

Wachstumskinetik der hUC-MSCs, die die Wirkung der direkten und indirekten MF-Exposition der toten Zellen zeigt. (a) Ein ähnliches Wachstumsmuster, beginnend mit der Verzögerungsphase, gefolgt von der Phase des exponentiellen Wachstums am Tag 4–10 und beendet mit der stationären Phase, zeigten Zellen in der Direkt- und Kontrollgruppe. (b) Vergleiche der Zellzahl an Tag 4 (Dauer der Lag-Phase) und Tag 10 (Exponentialphasen-Peak) zwischen DE-, IE- und NC-Gruppen.* zeigt einen statistisch signifikanten Anstieg im Vergleich zur Kontrolle (NC), während # statistisch anzeigt signifikanter Rückgang im Vergleich zur Kontrolle (NC) (p < 0,05). (c) Populationsverdopplungszeit (PDT) der MF-exponierten (DE und IE) sowie der Kontroll-hUC-MSCs (NC) von Passage 1 bis Passage 6. Die PDT wurde verringert, als sich die Zelle bis Passage 4 ausdehnte und danach Plateau bis zur 6. Passage. * zeigt einen statistisch signifikanten Anstieg der Zellzahl im Vergleich zur Kontrolle (NC). Es gibt jedoch keinen signifikanten Unterschied zwischen der PDT der Zellen in der DE-Gruppe und denen der NC-Gruppe (p < 0,05).

Die Charakterisierung der hUC-MSCs, die durch Auswertung der Expression von Zelloberflächenmarkern nach der MF-Exposition durchgeführt wurde, zeigte, dass MF mit Ausnahme von CD105 die immunphänotypische Integrität der Zellen auch nach 72-stündiger Kulturinkubation nicht vollständig verändert. Die Ergebnisse zeigten, dass die Zellen in allen drei Gruppen eine negative Expression für immunologische und hämatologische Marker aufwiesen, d. h. CD14, CD80, CD86 und HLA DR, DP, DQ gekoppelt mit einer positiven Expression für MSC-Marker ii. CD29, CD73, CD105 und HLA-ABC (Abb. 3a – e) Die Antikörper wurden von Benton Dickinson gekauft, mit Ausnahme von CD105, das vom F&E-System gekauft wurde (Tabelle 1). Darüber hinaus gab es keinen signifikanten Unterschied in den Expressionsniveaus der Zelloberflächenmarker zwischen der DE- und IE-Gruppe im Vergleich zur NC-Gruppe. Wie in Abb. 3a dargestellt, weisen mehr als 90 % der Zellen in der DE-Gruppe eine positive Expression für CD29, CD73 und HLA-ABC auf, wobei der Prozentsatz positiv für CD105 ist (37,4 %). Ein ähnlicher Trend wurde in der IE-Gruppe beobachtet (Abb. 3b), die eine positive Expression von > 90 % für CD29 und CD73 zeigte, mit Ausnahme von HLA-ABC und CD105 mit 84,2 % bzw. 47,9 % positiver Expression. Schließlich exprimierten mehr als 90 % der Zellen in der NC-Gruppe (Abb. 3c) CD29, CD73 und HLA-ABC, mit Ausnahme von CD105, wo der Prozentsatz 62,6 % beträgt. Zellen in allen drei Gruppen hatten eine Expression von weniger als 1 % für CD14, CD80 und CD86 sowie HLA-DR. Da hUC-MSCs auch nach Exposition gegenüber SMF positiv für die MSC-Expression waren, kann gefolgert werden, dass SMF SmCo5 auch nach 72-stündiger Kultivierung in MF-Umgebung zu keiner signifikanten Wirkung oder veränderten Immunphänotypisierung von hUC-MSCs beiträgt. Obwohl es zu einer signifikanten Verringerung der Expression von CD105 kam, führte MF bei der Behandlung nicht zu signifikanten Unterschieden im Oberflächenphänotyp von MSCs (Abb. 3d, e).

(a) Kontrollpanel- und Zelloberflächenmarker-Expression auf den direkt exponierten (DE) hUC-MSCs. Die Zellen zeigten eine positive Expression von mehr als 90 % für CD29, CD73 und HLA-ABC, mit einem geringeren positiven Prozentsatz für CD105, nämlich nur 37,4 %, während eine Expression von weniger als 1 % für CD14, CD80 und CD86 sowie HLA-DR beobachtet wurde. (b): Expression von Kontrollpanel und Zelloberflächenmarkern auf den indirekt exponierten (IE) hUC-MSCs. Die Zellen zeigten eine positive Expression von mehr als 90 % für CD29, CD73 und HLA-ABC, mit einem geringeren positiven Prozentsatz für CD105, nämlich nur 47,9 %, während eine Expression von weniger als 1 % für CD14, CD80 und CD86 sowie HLA-DR beobachtet wurde. (c) Expression von Kontrollpanel- und Zelloberflächenmarkern auf den Kontroll-hUC-MSCs (NC). Die Zellen zeigten eine positive Expression von mehr als 90 % für CD29, CD73 und HLA-ABC, mit einem geringeren positiven Prozentsatz für CD105, nämlich nur 62,6 %, während eine Expression von weniger als 1 % für CD14, CD80 und CD86 sowie HLA-DR beobachtet wurde. (d): Das Ergebnis zeigt, dass die Expression der Zelloberflächenmarkerproteine CD29, CD73 und HLA-ABC zwischen DE und IE im Vergleich zu NC ähnlich ist, während Endoglin (CD105) in DE- und IE-Gruppen im Vergleich zu NC deutlich zurückgegangen ist Gruppe. * zeigt eine statistisch signifikante Gruppe im Vergleich zur Negativkontrolle. (e) Das Ergebnis zeigt das ähnliche Expressionsmuster hämatologischer und immunologischer Marker in MSCs ohne signifikante Unterschiede zwischen den Gruppen. (f) Differenzierung von hUC-MSCs in Osteozyten. MSCs wurden bis zur Konfluenz kultiviert und unter Verwendung eines geeigneten Mediums insgesamt 21 Tage lang zur Differenzierung in Osteozyten angeregt. Einem zytochemischen Färbungsexperiment zufolge konnten die mit beiden Testgruppen (DE, IE) behandelten hUC-MSCs zu osteogenen Zellen heranwachsen. Mit Alizarin Red S gefärbte Kalziumablagerungen zeigten eine osteogene Differenzierung. Alle mikroskopischen Aufnahmen wurden mit dem Umkehrmikroskop CKX41 (Olympus, Japan) mit 100-facher Vergrößerung aufgenommen.

In der Voruntersuchung der Differenzierungsstudie wurden die hUC-MSCs der DE- und IE-Gruppen bis zur Konfluenz kultiviert und einer osteogenen Differenzierung unterzogen. Die Zellen wurden 21 Tage lang in einem osteogenen Induktionsmedium unter Verwendung eines kommerziell erhältlichen MSC-Testkits zur osteogenen Differenzierung inkubiert. Die hUC-MSCs aus beiden Testgruppen konnten eine osteogene Differenzierung durchlaufen und exprimierten osteogene Marker, die durch zytochemische Färbung sichtbar gemacht wurden. Die Kalziumablagerung als Zeichen der osteogenen Differenzierung zeigte eine leuchtend rote Färbung, als die Zellen im osteogenen induktiven Medium gezüchtet und mit Alizarin Red S angefärbt wurden (Abb. 3f)).

Da SMF SmCo5 die Proliferation in der exponentiellen Phase steigern konnte, wurden weitere Experimente durchgeführt, um den DNA-Gehalt von hUC-MSCs über den Zellzyklus zu untersuchen. Wie in Abb. 4a gezeigt, zeigten unsere Ergebnisse, dass nach 18 Stunden die größere Anzahl der mit MF behandelten Zellen eine höhere PI-Signalintensität aufwies, die nach der S- und G2/M-Phase (55,18 % bzw. 21,75 %) im Vergleich zu IE beobachtet wurde und NC-Gruppen, was darauf hindeutet, dass die DE-Gruppe in die S- und G2/M-Phase eingebunden war. Schließlich schienen Faktoren wie die MF-Stärke von 21,6 mT und MF-Expositionsperioden von 18 bis 30 Stunden gegenüber hUC-MSCs keine signifikante Rolle im Zellzyklus für NC zu spielen. Daher legt dieser Befund nahe, dass die mit DE SMF behandelten hUC-MSCs einen optimalen Zustand darstellen, der es hUC-MSCs ermöglicht, in den Zellzyklus überzugehen (bereits nach 18 Stunden). Der Vergleich zwischen 18, 24 und 30 Stunden ist in Abb. 4b–d zu sehen.

(a) DNA-Verteilung, die die Zellzyklusanalyse der MF-exponierten (DE und IE) sowie der Kontroll-hUC-MSCs (NC) nach 18, 24 und 30 Stunden Kultur zeigt. Die Zellen im DE waren die ersten, die in den Zellzyklus übergingen (bereits nach 18 Stunden), da die G0/G1-Phase deutlich abnahm, während die S- und G2/M-Phase zunahm. Die IE-Gruppe folgte dem Trend nach 24 Stunden, während die NC-Gruppe bis 30 Stunden zurückblieb. Grafischer Vergleich zwischen den Zellzyklusphasen der DE-, IE- und NC-Gruppen. (b) Das Bild zeigt die verringerte G0/G1-Phase und erhöhte S- und G2/M-Phasen in der DE-Gruppe im Vergleich zur NC-Gruppe nach 18 Stunden Kultur. (c) Zeigt die verminderte G0/G1-Phase und die erhöhten S- und G2/M-Phasen in der IE-Gruppe im Vergleich zur NC-Gruppe nach 24-stündiger Kultur, während (d) zeigt, dass es keinen signifikanten Unterschied in den Zellzyklusphasen zwischen ihnen gab die exponierte Gruppe und die Kontrollgruppe. * Zeigt einen statistisch signifikanten Anstieg des Zellanteils im Vergleich zur Kontrolle (NC), während # einen statistisch signifikanten Rückgang des Zellprozentsatzes im Vergleich zur Kontrolle (NC) zeigt (p < 0,05).

Eine Agarosegelelektrophorese des Reverse-Transkriptase-Polymerase-Reaktionsprodukts (RT-PCR) wurde durchgeführt, um die Expression der Gene OCT4, SOX2, NANOG und REX-1 zu bestimmen, die induzierte Stammzellenmarker darstellen und hauptsächlich in undifferenzierten Zellen von hUC-MSCs exprimiert werden. Insgesamt zeigten die behandelten Proben (DE) im Vergleich zu den Kontrollen (IE und NC) eine höhere Expression dieser Gene, Abb. 5a. Aus Abb. 5b geht hervor, dass die DE-Gruppe im Vergleich zu IE zu einem signifikanten Anstieg der Expression von NANOG (2,73-fach) führte. Es wurde kein signifikanter Unterschied der OCT4-, SOX2- und REX1-Expression zwischen den DE- und IE-Gruppen beobachtet, obwohl die MF-Exposition in der DE-Gruppe im Vergleich zu den IE-Gruppen offenbar eine leicht erhöhte Expression von OCT4 zu haben schien. Diese Ergebnisse zeigten, dass die Exposition gegenüber MF die Expression dieser Markergene nicht verringert, sondern möglicherweise die Stammeigenschaften von hUC-MSCs aufrechterhalten kann (Supplementary File).

Genexpression von pluripotent-assoziierten Markern (OCT4, SOX2, NANOG und REX-1) in MF-exponierten hUC-MSCs. (a) Das RT-PCR-Produkt wurde auf Agarosegel-Elektrophorese durchgeführt, um die Expressionsintensität der Marker zu bestimmen, die hauptsächlich in undifferenzierten MSCs exprimiert werden. (b) Faltungsänderung, die die Hochregulierung von OCT4 sowohl in der DE- als auch in der IE-Gruppe zeigt, wobei die Expressionsniveaus in der DE-Gruppe im Vergleich zur IE-Gruppe höher sind. Das SOX2-Gen war in den DE- und IE-Gruppen signifikant herunterreguliert, während NANOG in DE (2,73-fache Veränderung) im Vergleich zu den IE-Gruppen signifikant hochreguliert war.

Die in dieser Studie beobachteten Ergebnisse weisen auf das Potenzial des MF bei der Steigerung der In-vitro-Proliferation von hUC-MSCs hin. Die Auswirkungen von MF wurden erstmals auf die morphologischen Eigenschaften der hUC-MSCs beobachtet. Obwohl die Untersuchung keine sichtbaren morphologischen Unterschiede zwischen der DE-, IE- und Kontrollgruppe (NC) zeigte, gab es eine spürbare Verbesserung in der Geschwindigkeit, mit der Konfluenz erreicht wird. Darüber hinaus zeigten die mit MF behandelten Zellen eine ähnliche Morphologie wie unbehandelte Zellen (NC), da sie das typische Aussehen und die typische Morphologie gesunder hUC-MSCs (fibroblastenartig und spindelartig geformt) beibehielten, was mit den von berichteten Studien übereinstimmt Marędziak et al.47 und Du et al.48. Dies deutet daher darauf hin, dass die direkte Exposition gegenüber MF eine wirksame Methode zur Erhöhung der Ausbreitungsgeschwindigkeit bei gleichzeitiger Aufrechterhaltung normaler morphologischer Strukturen darstellen könnte. Das positive Ergebnis der Wachstumskinetik-Zeitanalyse unterstützt die aus den morphologischen Beobachtungen gezogenen Schlussfolgerungen zusätzlich. Die DE-Zellen zeigten am 4. Tag eine höhere Zellzahl im Vergleich zu IE und NC, wo die exponentielle Phase einsetzte, was darauf hindeutet, dass die MF-Exposition die Wachstumskinetik von hUC-MSCs deutlich verbessert und somit die rechtzeitige In-vitro-Vermehrung unterstützt. Unsere diesbezüglichen Beobachtungen standen im Gegensatz zu drei anderen Studien. Erstens zeigten Wiskirchen et al.49, dass die Proliferationskinetik durch die Exposition gegenüber MFs nicht verändert wurde und dass die wiederholte Exposition gegenüber einem statischen Magnetfeld (SMF) von 0,2, 1,0 und 1,5 T keine Auswirkungen auf die Proliferation menschlicher fetaler Lungenfibroblastenzellen (HFLF) hatte nach 21 Tagen. In ähnlicher Weise wurden von Miyakoshi50 gegensätzliche Ergebnisse berichtet, bei denen es zu keiner Veränderung der Proliferationskinetik kam, nachdem Zellen dem MF ausgesetzt waren. Drittens zeigten Sun et al., dass die kinetische Analyse von mesenchymalen Knochenmarksstammzellen (BMMSCs) während der exponentiellen Wachstumsphase nicht wesentlich durch das gepulste elektromagnetische Feld (PEMF) beeinflusst wurde43. Im Gegensatz zu ihren Ergebnissen hat unsere Studie die Wachstumskinetik erfolgreich verändert, was möglicherweise hauptsächlich auf die Methode der magnetischen Exposition sowie auf die Quellen der Zellen zurückzuführen ist, die für die Exposition gegenüber magnetischen Feldern verwendet werden. Zusätzlich zu der oben genannten Beobachtung verringerte die Populationsverdopplungszeit den Anstieg der Durchgangszahlen sowohl in der Test- als auch in der Kontrollgruppe. Allerdings wurde in der DE-Gruppe im Vergleich zu den IE- und NC-Gruppen eine kürzere Verdopplungszeit beobachtet. Diese Beobachtung steht im Einklang mit der Beobachtung von Marędziak et al.51, wo sie berichteten, dass die höchste Proliferationsrate bei aus menschlichem Fettgewebe gewonnenen mesenchymalen Stromastammzellen (hASCs) beobachtet wurde, die unter MF-Bedingungen kultiviert und mit der kürzesten PDT vermehrt wurden. Im Gegensatz dazu berichteten Sadri et al.52 über die Behandlung von hUC-MSCs mit SMF bei 18 mT und stellten fest, dass der SMF dazu führte, dass die PDT im Vergleich zur Kontrollgruppe länger wurde. Hier haben wir erfolgreich gezeigt, dass eine direkte Exposition von MF gegenüber hUC-MSC bei 21,6 mT SMF eine optimale Voraussetzung für die Steigerung der Zellproliferation mit der kürzesten PDT ist.

Die Charakterisierung der hUC-MScs bei MF-Exposition erfolgte weiter durch die Analyse der Zelloberflächenmarker. Es zeigte sich, dass sich die CD-Marker der DE- und IE-Gruppen im Vergleich zur NC-Kontrollgruppe nicht unterschieden. Die Ergebnisse zeigten, dass Zellen auch nach 72-stündiger Kultivierung in einer MF-exponierten Umgebung mesenchymale Stammzell-ähnliche Phänotypen aufweisen. Die MSCs stellen hinsichtlich ihrer Morphologie, Physiologie und Expression von Oberflächenantigenen eine heterogene Zellpopulation dar. Bisher wurden keine einzelnen spezifischen Zelloberflächenmarker identifiziert und für MSCs verallgemeinert. In dieser Studie haben wir gezeigt, dass die mittels Durchflusszytometrie isolierten hUC-MSCs homogen waren und keine Kontamination durch hämatopoetische Stammzellen und ihre Vorläufer aufwiesen. Dies wurde durch unsere experimentellen Immunfluoreszenzdaten bestätigt, die die positiven Marker CD29, CD73, CD105 und HLA-ABC sowie die fehlende Expression der negativen Marker CD14 und HLA-DR sowie der co-stimulierenden Marker CD80, CD86 in den Kulturen repräsentierten. Es ist jedoch wichtig zu beachten, dass die Expressionsniveaus für CD105 in den exponierten Gruppen, dh DE und IE, deutlich zurückgingen. Die verringerte Expression von CD105 in DE und IE im Vergleich zu NC lässt auf eine mögliche Veränderung ihres Zellschicksals schließen. Ob die beobachtete Abnahme mit einer unterdrückten oder verbesserten biologischen Funktion verbunden sein könnte, bedarf weiterer Untersuchungen. Abgesehen von CD105 gab es keinen signifikanten Unterschied in den Expressionsniveaus der Zelloberflächenmarker zwischen den exponierten und den Kontrollen. Ähnliche Ergebnisse wurden von Sun et al.43 erhalten, da sie berichteten, dass die MF-Exposition die beobachtete Morphologie des Oberflächenphänotyps und das Differenzierungspotenzial mehrerer Abstammungslinien für die BM-MSCs nicht wesentlich beeinflusst. Da die hUC-MSCs positiv auf die MSC-Expression (Oberflächenanhaftung und Zelloberflächenexpression) reagierten, auch nachdem sie MF ausgesetzt waren, kann gefolgert werden, dass der MF nicht zu einer signifikanten Wirkung oder einer Veränderung des Immunphänotyps der hUC-MSCs durch den MF beiträgt nach 72 Stunden Kultivierung in MF-Umgebung.

Bei der Kultivierung in einem osteogenen Induktionsmedium wurden die in der Kultur erzeugten hUC-MSCs anhand der zytochemischen Färbung in Osteozyten differenziert. Insbesondere hat sich die angeborene fibroblastenähnliche Morphologie von MSCs während der induzierten Osteogenese in quaderförmige Formen verändert. Wenn diese Zellen mit Alizarinrot gefärbt wurden, schienen sie aufgrund der Zellaggregation und Knötchenbildung eine ziegelrote Farbe zu haben. Ein bestimmter Bereich des Färbepigments erschien dichter und es wird angenommen, dass es sich um eine Kalziumablagerung handelt, einen häufigen Osteogenese-Indikator. Die Ergebnisse der aktuellen Studie ähneln den von53,54,55 durchgeführten Studien. Es sollte jedoch eine weitere Charakterisierung der Osteogenese durchgeführt werden, um diese Beobachtung gründlich zu validieren. Beispielsweise kann der Kalziumgehalt dieser Zellen über einen kolorimetrischen Test weiter beurteilt werden, und RT-qPCR kann verwendet werden, um das Vorhandensein von Osteozyten-Markern zu identifizieren. Darüber hinaus kann die Western-Blot-Analyse das Vorhandensein von Proteinen im Zusammenhang mit der Osteogenese bewerten. Unsere vorläufigen Ergebnisse stützen die Annahme, dass SMF SmCo5 das multipotente Differenzierungspotenzial von hUC-MSCs, insbesondere das osteogene Potenzial, nicht beeinflusst.

Proliferationstests mit Techniken wie MTT und Zellzyklus haben eine erhöhte Proliferation von MSC nach Exposition gegenüber MF51,52,56 gezeigt. Unser Ergebnis zeigte, dass die Zellen in der DE-Gruppe im Vergleich zu den IE- und NC-Gruppen bereits 18 Stunden nach der Kultivierung in den Zellzyklus einbezogen wurden. Im Laufe der Zeit kann es bei hUC-MSC zu einer zellulären Seneszenz kommen, bei der mehr Zellen in der G0/G1-Phase angehalten werden57. Die Alterung von Zellen hängt eng mit der Telomeraseaktivität und der Telomerlänge zusammen. Obwohl die Telomerlänge und die Telomeraseaktivität in der Präsenzstudie nicht gemessen wurden, kann die Förderung des Fortschreitens des Zellzyklus und die Verringerung der Apoptoseaktivität, wie durch den Zellzyklus angezeigt, indirekt auf die Telomeraseaktivität hinweisen. Dies legt nahe, dass eine verstärkte MF das Überleben von hUC-MSCs induzieren kann oder dass MF als antiapoptotisches Mittel für den Zellzyklusmechanismus von 6 bis 48 Stunden wirkt. Möglicherweise verlassen die Zellen den Ruhezustand und vermehren sich weiter; und somit kann der Alterungsprozess durch MF-Exposition verhindert werden. Um dies zu bestätigen, sollten zur weiteren Untersuchung Messungen der Apoptoseaktivität wie Caspase-Assays durchgeführt werden. Die erhaltenen Ergebnisse zeigten, dass der MF die Anzahl der Zellen in der erkannten S- und G2/M-Phase erhöht, wie in der DE-Gruppe beobachtet.

Unsere RT-PCR-Genexpressionsanalyse ergab, dass die NANOG-Expression in DE im Vergleich zu IE in Passage 3 um das 2,73-fache anstieg. Dies steht im Einklang mit den Erkenntnissen von Rinaldi et al.58, wo die Exposition gegenüber Radio Electric Asymmetric Conveyer (REAC) 30 verursachte -facher Anstieg der NANOG-Expression in MSCs, sogar in Zellen bei Passage 30. Dies führte folglich zu einer Hochregulierung der Bmi1-Expression, die eine zentrale Rolle bei der DNA-Reparatur und Selbsterneuerung von Stammzellen spielt. Daher könnte MF in der Studie die Zellproliferation durch erhöhtes NANOG fördern, wie es bei REAC beobachtet wurde. Die verringerte Expression des SOX-2-Gens lässt darauf schließen, dass sich in den mit DE behandelten Zellen im Vergleich zu IE und NC eine differenziertere Subpopulation von Zellen bildete. Diese Beobachtung rechtfertigt die Tatsache, dass das Zellschicksal durch SMF tatsächlich durch ein biologisches Phänomen beeinflusst wird, das weitere Untersuchungen erfordert.

Die vorliegende Studie zeigte, dass MF mit einer Intensität von 21,6 mT die In-vitro-Proliferation stimulieren und die Vermehrung von hUC-MSCs verbessern kann, ohne seine immunphänotypische Integrität zu beeinträchtigen. Diese Leistungsfähigkeit kann jedoch weiter erforscht werden, indem die Auswirkungen der MF-Exposition auf wichtige Signalwege mithilfe globaler Genevaluierung und computergestützter Biologie-Tools analysiert werden. Die aktuellen Studien waren eher auf die Entdeckung des grundlegenden Potenzials der MF-Exposition bei der Expansion von MSCs ausgerichtet. Die erhöhte Genexpression von NANOG neben anderen assoziierten pluripotenten Markern wie OCT4, SOX2 und REX-1 könnte auf ein potenzielles unerwünschtes Ereignis hinweisen, da sich eine solche Koexpression von NANOG und OCT4 in früheren Literaturstellen in einer schlechten Prognose mehrerer bösartiger Erkrankungen niedergeschlagen hatte einschließlich Lungen-, Gliom- und Nierenzellkarzinomen59,60,61,62. Daher wird eine separate Studie durchgeführt, um die Angelegenheit eingehender zu untersuchen und eine konkretere Schlussfolgerung zu ihrer Sicherheit zu ziehen. Weitere Untersuchungen würden auch verschiedene genetische und metabolomische Studien, Untersuchungen zu den MF-Expositionen mit der Stammzellenbildung und dem Wachstum von Krebsstammzellen und den Auswirkungen auf die Krebsentstehung umfassen. Darüber hinaus ist eine wichtige Beobachtung, die in der vorliegenden Studie gemacht wurde, die schlechte Leistung der indirekten Exposition von MF gegenüber hUC-MSCs, wie aus den Ergebnissen der Zell-IE-Gruppe während der gesamten Studie hervorgeht. Obwohl die IE-Gruppe als technische Kontrolle eingeführt wurde, zeigte sie, dass die Möglichkeit einer unerwünschten Wirkung besteht, wenn MSCs indirekt MF ausgesetzt werden. Es wird jedoch empfohlen, bei der Durchführung zukünftiger Studien den Abstand der Magnetquelle zu den biologischen Eigenschaften von MSCs zu berücksichtigen.

In der Studie wurde Samarium-Kobalt verwendet, ein Seltenerdmagnet aus einer Samarium- und Kobaltlegierung, der eine große und dauerhafte Magnetisierung bietet. Die magnetische Komponente bestand aus zwei Samarium-Kobalt-Magnetzylindern (SmCo5 oder SmCo Serie 1:5). Jeder Magnetzylinder war 4 cm dick und hatte einen Durchmesser von 9,5 cm und war mit Nickel beschichtet, um Abplatzungen zu vermeiden und die Oberfläche härter zu machen. Die SmCo5-Magnetzylinder wurden mithilfe eines einstellbaren Positionierers mit einander zugewandten Nord- und Südpolen im CO2-Inkubator (Galaxy S., USA) installiert. Da SmCo5-Magnete anisotrop sind, wurde die MF nur in einer Richtung erzeugt. Abbildung 6a zeigt die schematische Verteilung der MF-Intensität von der Oberfläche des Permanentmagneten. Die höchste MF-Intensität betrug 21,6 mT und wurde mit einem Gaussmeter (DC Gaussmeter Modell GM 1-ST, Typ ALPHALAB Inc, USA) gemessen und aufgezeichnet, das auf den Zellkulturen in der Mitte zwischen den Permanentmagneten platziert wurde, wo die MF gründlich war gleichmäßig (Abb. 6b). Der Inkubator verfügt über drei Fächer, nämlich das obere, mittlere und untere Fach, wobei der SmCo5-Magnet im unteren Fach aufbewahrt wird.

© ist dort, wo der MF am gleichmäßigsten und intensivsten ist. (b) Aufbau, der zeigt, wie Zellen in den direkt exponierten (DE) und indirekt exponierten (IE) Gruppen an verschiedenen Stellen im Inkubator platziert wurden. Die DE-Gruppe und die IE-Gruppe befinden sich im selben Inkubator und die Negativkontrollgruppe (NC) in einem anderen Inkubator.

(a) Das obige schematische Diagramm zeigt die Verteilung der MF-Linien zwischen einem Paar Seltenerdmagneten. Der mittlere Bereich zwischen den beiden Magnetzylindern

Vollständig charakterisierte hUC-MSCs wurden von der Stem cell & Immunity Research Group, Immunology Laboratory, Department of Pathology, Faculty of Medicine and Health Sciences, University Putra Malaysia erhalten. Nabelschnur-MSCs wurden aus Wharton-Gelee der menschlichen Nabelschnur gewonnen. Die menschlichen Nabelschnüre wurden aus Vollzeitgeburten im Britannia Women and Child Hospital, Kajang, Selangor, Malaysia, gewonnen, nachdem die Einwilligung aller Probanden und/oder ihrer Erziehungsberechtigten eingeholt worden war. Die Sammlung und Verwendung von menschlichem Nabelschnurgewebe wurde von der Ethik- und Forschungskommission der Fakultät für Medizin und Gesundheitswissenschaften der Universiti Putra Malaysia genehmigt. Alle Methoden und Verfahren zur Verwendung menschlicher Zellen wurden in Übereinstimmung mit den einschlägigen Richtlinien und Vorschriften, einschließlich der Deklaration von Helsinki, durchgeführt. Die Zellen wurden in F12 Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM-F12) kultiviert, bestehend aus Dulbecco GLUTAMAX (Gibco, Vereinigtes Königreich), ergänzt mit 10 % fötalem Rinderserum (FBS), 1 % Penicillin/Streptomycin, 0,5 % Fungizon und 0,1 % Gentamycin ( Gibco, Vereinigtes Königreich). Das optimierte Kulturmedium für hUC-MSC wurde frisch zubereitet, wie in Tong et al.63 beschrieben. Basierend auf dem experimentellen Design wurden die Zellen in drei Gruppen eingeteilt: i-die DE-Gruppe wurde in der Mitte zwischen den Permanentmagneten positioniert, wo die Intensität des MF (21,6 mT, gemessen mit dem Gauss-Meter) am höchsten und gleichmäßigsten war; ii- Die IE-Gruppe wurde im oberen Fach desselben Inkubators wie die DE-Gruppe platziert, während iii- die NC-Gruppe in einem anderen Inkubator ohne MF-Exposition platziert wurde. Die Anordnung der Zellen im Inkubator orientierte sich am Versuchsaufbau und ist in Abb. 6b dargestellt. Alle Kulturbedingungen in den verwendeten Inkubatoren wurden bei 37 °C gehalten und mit 5 % CO2 versorgt.

Die hUC-MSCs wurden in einer 60-mm-Petrischale mit 1 × 104 Zellen ausgesät und bis zur Passage Nummer 6 kultiviert. Die Morphologie der Zellen wurde alle zwei Tage unter Verwendung eines Phasenkontrast-CKX41-Umkehrmikroskops (Olympus, Japan) beobachtet. Die für den Test (DE und IDE) und die Kontrollgruppe (NC) bei Durchgang 3 erhaltenen Bilder wurden aufgezeichnet.

Im wachstumskinetischen Experiment wurden 1 × 104 hUC-MSCs bei Durchgang 3 in eine 60-mm-Petrischale ausgesät. Für jede Gruppe wurden die Zellen für 6 Inkubationszeitpunkte, Tag 2, 4, 6, 8, 10 und 12, in verschiedenen Petrischalen ausgesät. Nach der Reifung jedes Inkubationstages wurden die Zellen durch Trypsinisierung mit TrypLE™ Select Enzyme geerntet (ThermoFisher Scientific, USA) und wurden durch einen Trypanblau-Ausschlusstest unter Verwendung einer Trypanblau-Lösung (Sigma-Aldrich, USA) gezählt. Die Daten wurden nach der Zählung analysiert. In ähnlicher Weise wurden für die Verdopplungszeitanalyse auch 1 × 104 hUC-MSCs bei Durchgang 3 in 60-mm-Petrischalen ausgesät und unter den gleichen Bedingungen wie oben beschrieben behandelt. Die Zellen wurden durch Trypsinisierung mit TrypLE™ Select Enzyme (ThermoFisher Scientific, USA) geerntet und dann manuell mit einem Hämozytometer unter einem Mikroskop gezählt. Die Wachstumsrate, die der Kehrwert der Generationszeit ist, ist definiert als die Anzahl der Zellen, die sich pro Zeiteinheit während eines bestimmten Zeitintervalls verdoppeln. Die Verdopplungszeit wurde durch die Patterson-Formel bestimmt und als mittlere Verdopplungszeit ausgedrückt.

Die hUC-MSCs (2 × 105 Zellen) bei Passage 3 wurden in T-25-Gewebekulturflaschen kultiviert und 72 Stunden lang inkubiert. Nachdem eine Konfluenz von etwa 80–90 % erreicht war, wurden die Zellen geerntet, gezählt und 1 × 106 Zellen wurden in fluoreszenzaktivierte Zellsortierungsröhrchen (FACS) überführt. Die Zellen wurden dann in kalter 1 × Phosphatpuffer-Kochsalzlösung (PBS) gewaschen und mit 1,5 μl pro 105 Zellen Panel-MSCs-Anti-Human-Monoklonal-Antikörpern angefärbt: wie in Tabelle 1 angegeben. Die gefärbten Zellen wurden mindestens 15 Minuten lang bei 2 inkubiert –8 °C. Danach wurden die Zellen gewaschen und in 500 μl PBS resuspendiert und die Zelloberflächenmarker wurden durch Erfassung von 104 mit Antikörpern markierten Zellen unter Verwendung eines BD LSR FORTESSA-Durchflusszytometers (BD Bioscience, USA) nachgewiesen. Parallel zu allen Messungen wurden ungefärbte und mit Fluorochrom konjugierte, unspezifische Isotyp-markierte Zellen als Kontrolle verwendet, um ein negatives Gating einzustellen. Die erhaltenen Daten wurden mit der vom Hersteller bereitgestellten Cell Quest Pro-Software (Becton Dickinson CellQuest Software, USA) analysiert.

Passage 3 hUC-MSCs wurden im Rahmen der mesodermalen Potenzialbewertung mit dem StemPro Osteogenesis Differentiation Kit (Gibco, Invitrogen, USA) auf ihre osteogene Differenzierungskapazität getestet. Für die DE-Gruppe wurden 10.000 hUC-MSCs-Zellen in T-25-Flaschen, ergänzt mit vollständigem MSC-Medium, ausgesät und bei 37 °C und 5 % CO2-Bedingungen inkubiert, bis eine Monoschicht aus Konfluenzzellen erreicht wurde. Nach Erreichen der Konfluenz wurde das Zellkulturmedium für weitere 21 Tage alle 3 Tage durch ein osteogenes Differenzierungsmedium ersetzt. Bei der Kontrollgruppe wurden die Zellen während der gesamten Studie nur in vollständigem MSC-Medium gehalten. Am Ende des 21. Tages wurden die Zellen geerntet und 60 Minuten lang mit 70 % Ethanol fixiert. Anschließend erfolgt eine 30-minütige Färbung mit Alizarinrot-Lösung. Alle Zellkulturen wurden unter einem inversen Phasenkontrastmikroskop CKX41 (Olympus, Japan) beobachtet und ihre Bilder wurden aufgenommen.

Die hUC-MSCs wurden in Platten mit 6 Vertiefungen in einer Anzahl von 5 × 104 Zellen pro Vertiefung ausgesät. Die Zellen wurden zu drei verschiedenen Zeitpunkten (18, 24 und 30 Stunden) gruppiert und entsprechend inkubiert. Nach jeder Inkubationsperiode wurden die Zellen geerntet, in kaltem PBS gewaschen und dann mit 70 % Ethanol über Nacht bei –20 °C fixiert. Die fixierten Zellen wurden dann zweimal gewaschen und in 25 µL 10 mg/ml RNase (Sigma-Aldrich, USA) suspendiert und mit 500 µL Färbepuffer bestehend aus 1 mg/ml Propidiumiodid (PI)-Färbung (Molecular Probe, Invitrogen) inkubiert. 30 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert. Die DNA-Verteilung der Zelle wurde durch Erfassung von 104 PI-markierten Zellen unter Verwendung eines BD LSR FORTESSA-Durchflusszytometers (BD Bioscience, USA) analysiert. Die Analyse der erfassten Daten wurde mit der ModFit LT-Software (Verify Software House, USA) durchgeführt.

Alle üblichen Vorsichtsmaßnahmen beim Umgang mit RNA wurden berücksichtigt, um Kontaminationen zu vermeiden. Die Gesamt-RNA aus Zellpellets wurde mit dem RNeasy Mini Kit (Qiagen, Deutschland) gemäß dem Protokoll des Herstellers extrahiert. Die extrahierte RNA wurde durch 1-minütige Zentrifugation bei 13.000 U/min mit RNase-freiem Wasser auf 50 µl eluiert. Die RNA-Konzentration und -Reinheit wurden mit dem Nano-Drop ND-1000-Spektrophotometer (Thermo Fisher Scientific Inc., USA) gemessen. Die RNA (500 ng) wurde in eine Vertiefung mit 1,5 % Agarosegel (Sigma Sigma-Aldrich, USA) geladen und 60 Minuten lang bei 90 V einer Elektrophorese unterzogen. Die Integrität der gereinigten RNA wurde durch Visualisierung der ribosomalen 28S- und 18S-RNA-Banden beurteilt. Die cDNA wurde mit dem QuantiTect Reverse Transcription Kit (Qiagen, Deutschland) gemäß dem Protokoll des Herstellers generiert. Zur Erzeugung der cDNA wurde ein Mikrogramm (1 µg) gereinigte RNA verwendet. Die synthetisierte cDNA wurde bei –20 °C gelagert und die anschließende RT-PCR wurde unter Verwendung eines Standardprotokolls mit 40 Zyklen durchgeführt. Im Wesentlichen nach einer anfänglichen Denaturierung bei 94 °C für 10 Minuten, 40 Zyklen (Denaturierung bei 94 °C für 45 Sekunden, Annealing bei 58 °C für 30 Sekunden, Verlängerung bei 72 °C für 90 Sekunden), gefolgt von einer abschließenden Verlängerung bei 72 °C °C für 5 Min. RT-PCR-Amplifikate wurden auf einem 2 %igen Agarosegel (SeaKem® LE Agarose, Lonza, Schweiz) aufgetrennt und mit Ethidiumbromid angefärbt. Das Gel wurde mithilfe der Syngene Gel Documentation (Syngene, USA) sichtbar gemacht. Das Design der Primer GADPH, REX 1, SOX2 OCT4 und NANOG wurde aus der vorherigen Studie übernommen, wie in Tabelle 2 dargestellt. Die Bandenintensität der interessierenden Gene, die aus der Agarosegelelektrophorese des RT-PCR-Produkts erhalten wurden, wurde mithilfe des Bildes quantifiziert J™-Software, normalisiert gegen das Referenzgen (GADPH) und dann als fache Änderung in Bezug auf die NC-Gruppe unter Verwendung der folgenden Formel dargestellt.

Die Ergebnisse, die von behandelten Zellen und Kontrollzellen bei unterschiedlicher Aussaat von hUC-MSCs durch den Student-t-Test unter Verwendung von GraphPad Prism (Version 7) und signifikanten Werten erhalten wurden, wurden auf einen p-Wert < 0,05 festgelegt.

Prozentsatz

Plus minus

Grad Celsius

Tritiiertes Thymidin

Mesenchymale Stammzellen des Knochenmarks

Komplementäre Desoxyribonukleinsäure

Kohlendioxid

Zählen Sie pro Minute

Cluster der Bezeichnung

Gleichstrom

Direkte Belichtung

Dulbeccos modifiziertes Eagle-Medium

Desoxyribonukleinsäure

Stammzellen adulter Pferde

Extrem niedrige Frequenz

Extrem niederfrequentes Magnetfeld

Glycerinaldehyd-3-phosphat-Dehydrogenase

Gegahertz

Fluoreszenz-aktivierte Zellsortierung

Lebensmittel und Arzneimittel

Ruhephase

Lückenphase

Zweite Lücke

Menschliches Rinderserum

Menschlicher fetaler Lungenfibroblast

Human-Leukozyten-Antigen

Aus menschlicher Nabelschnur gewonnene mesenchymale Stammzellen

Hertz

Internationale Gesellschaft für Zelltherapie

Indirekte Belichtung

Kilovolt

Mitose

Meter

Magnetfeld

Milligramm

Großer Histokompatibilitätskomplex

Magneto-Hydrodynamik

Millimeter

Magnetresonanztomographie

Militesla

Megawatt

Pron.nanOg

Negativkontrolle

Neodym-Ferrum-Bor

Nanogramm

Octamer-bindender Transkriptionsfaktor-4

Phosphatgepufferte Kochsalzlösung

Zeit der Bevölkerungsverdoppelung

Gepulstes elektromagnetisches Feld

Propidiumiodid

Funkelektrischer asymmetrischer Förderer

Ribonukleinsäure

Ribonuklease

Reverse-Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion

Umdrehung pro Minute

Synthesephase

Supraleitend

Standardabweichung

Samarium-Kobalt

SRY (geschlechtsbestimmende Region Y) – Feld 2

Supraleitender magnetischer Energiespeicher

Statisches Magnetfeld

Zeit

Verdopplungszeit

Tesla

Transformierender Wachstumsfaktor Beta

Gewebefaktor

Video-Anzeigeterminal

Mikrogramm

Mikro-Currie

Mikroliter

Mikrotesla

Homologes Zinkfingerprotein 42

Wei, X. et al. Mesenchymale Stammzellen: Ein neuer Trend für die Zelltherapie. Acta Pharmacol. Sünde. 34, 747–754 (2013).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Buzhor, E. et al. Zellbasierte Therapieansätze: Die Hoffnung auf unheilbare Krankheiten. Regen. Med. 9, 649–672 (2014).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Miskon, A., Sasaki, N., Yamaoka, T., Uyama, H. & Kodama, M. Macromolecular Symposium 51–158 (Wiley Online Library, 2007).

Google Scholar

Tong, C. et al. Erzeugung bioartifizieller Herzen mithilfe dezellularisierter Gerüste und gemischter Zellen. Biomed. Ing. Online 18, 1–13 (2019).

Artikel Google Scholar

Ude, CC, Miskon, A., Idrus, RBH & Bakar, MBA Anwendung von Stammzellen im Tissue Engineering für die Verteidigungsmedizin. Mil. Med. Res. 5, 1–18 (2018).

CAS Google Scholar

Ude, CC et al. Knorpelregeneration durch chondrogen induzierte adulte Stammzellen im osteoarthritischen Schafmodell. PLoS ONE 9, e98770 (2014).

Artikel ADS PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

Caplan, AI Adulte mesenchymale Stammzellen für Tissue Engineering versus regenerative Medizin. J. Zelle. Physiol. 213, 341–347 (2007).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Sarmadi, VH et al. Durch menschliche mesenchymale Stammzellen vermittelte transkriptomische Regulation von Leukämiezellen zur Bereitstellung antitumorigener Wirkungen. Cell Transplant 29, 963689719885077. https://doi.org/10.1177/0963689719885077 (2020).

Artikel PubMed Google Scholar

Sarmadi, VH, Heng, FS & Ramasamy, R. Die Wirkung menschlicher mesenchymaler Stammzellen auf die Tumorzellproliferation. Med. J. Malaien. 63(Suppl A), 63–64 (2008).

Google Scholar

Pittenger, MF et al. Perspektive mesenchymaler Stammzellen: Von der Zellbiologie zum klinischen Fortschritt. NPJ Regen. Med. 4, 1–15 (2019).

Artikel CAS Google Scholar

Kolf, CM, Cho, E. & Tuan, RS Mesenchymale Stromazellen: Biologie adulter mesenchymaler Stammzellen: Regulierung von Nische, Selbsterneuerung und Differenzierung. Arthritis Res. Dort. 9, 1–10 (2007).

Artikel CAS Google Scholar

Pittenger, MF et al. Multilinienpotenzial erwachsener menschlicher mesenchymaler Stammzellen. Science 284, 143–147 (1999).

Artikel ADS CAS PubMed Google Scholar

Reyes, M. et al. Reinigung und Ex-vivo-Expansion postnataler mesodermaler Vorläuferzellen des menschlichen Knochenmarks. Blut 98, 2615–2625 (2001).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Friedenstein, AJ, Chailakhyan, RK, Latsinik, NV, Panasyuk, AF & Keiliss-Borok, IV Stromazellen, die für die Übertragung der Mikroumgebung der hämopoetischen Gewebe verantwortlich sind: Klonen in vitro und Retransplantation in vivo. Transplantation 17, 331–340 (1974).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Dang, LT-T., Bui, AN-T., Pham, VM, Phan, NK & Van Pham, P. Produktion inselartiger, insulinproduzierender Zellcluster in vitro aus aus dem Fettgewebe stammenden Stammzellen. Biomed. Res. Dort. 2, 1–9 (2015).

Artikel CAS Google Scholar

Potdar, PD & Prasannan, P. Differenzierung menschlicher dermaler mesenchymaler Stammzellen in Kardiomyozyten durch Behandlung mit 5-Azacytidin: Konzept für die regenerative Therapie bei Myokardinfarkt. Int. Sch. Res. Mitteilungen 2013, 1–9 (2013).

Google Scholar

Kazemnejad, S. et al. Biochemische und molekulare Charakterisierung von Hepatozyten-ähnlichen Zellen, die aus mesenchymalen Stammzellen des menschlichen Knochenmarks stammen, auf einem neuartigen dreidimensionalen biokompatiblen Nanofasergerüst. J. Gastroenterol. Hepatol. 24, 278–287 (2009).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Kopen, GC, Prockop, DJ & Phinney, DG Markstromazellen wandern durch das Vorderhirn und das Kleinhirn und differenzieren sich nach der Injektion in das Gehirn neugeborener Mäuse zu Astrozyten. Proz. Natl. Acad. Wissenschaft. USA 96, 10711–10716 (1999).

Artikel ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Nagamura-Inoue, T. & He, H. Aus der Nabelschnur stammende mesenchymale Stammzellen: Ihre Vorteile und potenzieller klinischer Nutzen. World J. Stem Cells 6, 195 (2014).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Ramasamy, R. et al. Die Wirkung menschlicher mesenchymaler Stammzellen auf den oxidativen Ausbruch von Neutrophilen. Malaien. J. Med. Gesundheitswissenschaft. 6, 11–17 (2010).

Google Scholar

Maqbool, M. et al. Menschliche mesenchymale Stammzellen hemmen die Differenzierung und Effektorfunktionen von Monozyten. Angeborenes Immunsystem. 26, 424–434. https://doi.org/10.1177/1753425919899132 (2020).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Ude, C. et al. Die Bewertung der Knorpeldifferenzierung unter Verwendung des transformierenden Wachstumsfaktors Beta3 allein und in Kombination mit dem knochenmorphogenetischen Protein-6 an adulten Stammzellen. Zellgewebebank. 18, 355–367 (2017).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Yamaoka, T. et al. Individuelle Bewertung der Herzmarkerexpression und des Selbstschlags während der Herzdifferenzierung von P19CL6-Zellen auf verschiedenen Kultursubstraten. J. Biomed. Mater. Res. Teil A 105, 1166–1174 (2017).

Artikel CAS Google Scholar

Miskon, A., Mahara, A., Uyama, H. & Yamaoka, T. Eine Suspensionsinduktion zur myokardialen Differenzierung von mesenchymalen Stammzellen der Ratte auf verschiedenen extrazellulären Matrixproteinen. Gewebe-Ing. Teil C 16, 979–987 (2010).

Artikel CAS Google Scholar

Miskon, A., Ehashi, T., Mahara, A., Uyama, H. & Yamaoka, T. Schlagverhalten primärer neonataler Kardiomyozyten und kardialer differenzierter P19. CL6-Zellen auf verschiedenen extrazellulären Matrixkomponenten. J. Artif. Organe 12, 111–117 (2009).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Baksh, D., Yao, R. & Tuan, RS Vergleich des proliferativen und multilinienspezifischen Differenzierungspotentials menschlicher mesenchymaler Stammzellen aus Nabelschnur und Knochenmark. Stammzellen 25, 1384–1392 (2007).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Li, C.-Y. et al. Vergleichende Analyse menschlicher mesenchymaler Stammzellen aus Knochenmark und Fettgewebe unter xenofreien Bedingungen für die Zelltherapie. Stammzellres. Dort. 6, 1–13 (2015).

Artikel CAS Google Scholar

Savitz, DA, Liao, D., Sastre, A., Kleckner, RC & Kavet, R. Magnetfeldexposition und Sterblichkeit durch Herz-Kreislauf-Erkrankungen bei Arbeitern von Elektrizitätsversorgungsunternehmen. Bin. J. Epidemiol. 149, 135–142 (1999).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Elmas, O. Auswirkungen der Exposition gegenüber elektromagnetischen Feldern auf das Herz: Eine systematische Übersicht. Toxicol. Ind. Health 32, 76–82 (2016).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Xu, D. & Roth, BJ Das vom Herzen erzeugte Magnetfeld und sein Einfluss auf die MRT. Mathematik. Probl. Ing. 2017, 1–9 (2012).

Google Scholar

Oliviero, A. et al. Transkranielle statische Magnetfeldstimulation des menschlichen motorischen Kortex. J. Physiol. 589, 4949–49585 (2011).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Roberts, DC et al. Das MRT-Magnetfeld stimuliert Rotationssensoren des Gehirns. Curr. Biol. 21, 1635–1640 (2011).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Katila, T., Maniewski, R., Poutanen, T., Varpula, T. & Karp, PJ Vom menschlichen Auge erzeugte Magnetfelder. J. Appl. Physik. 52, 2565 (1981).

Artikel ADS Google Scholar

Paolucci, T. et al. Elektromagnetische Feldtherapie: Eine rehabilitative Perspektive bei der Behandlung von Schmerzen des Bewegungsapparates: Eine systematische Übersicht. J. Schmerzres. 13, 1385–1400 (2020).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Zannella, S. Biologische Auswirkungen magnetischer Felder (CISE SpA, 1998).

Google Scholar

Gajsek, P. et al. Übersicht über Studien zur Bewertung der Exposition gegenüber elektromagnetischen Feldern (EMF) in Europa: Niederfrequente Felder (50 Hz–100 kHz). Int. J. Umgebung. Res. Öffentliche Gesundheit 13, 875 (2016).

Artikel PubMed Central Google Scholar

Ahlbom, A. et al. Eine gepoolte Analyse von Magnetfeldern und Leukämie im Kindesalter. Br. J. Cancer 83, 692–698 (2000).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Feychting, M., Forssén, U. & Floderus, B. Berufliche und häusliche Magnetfeldexposition sowie Leukämie und Tumoren des Zentralnervensystems. Epidemiology 8, 384–389 (1997).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Coble, JB et al. Berufliche Exposition gegenüber Magnetfeldern und das Risiko von Hirntumoren. Neuro Oncol. 11, 242–249 (2009).

Artikel PubMed PubMed Central Google Scholar

Kheifets, LI, Afifi, AA, Buffler, PA & Zhang, ZW Berufliche Exposition gegenüber elektrischen und magnetischen Feldern und Hirntumor: Eine Metaanalyse. J. besetzen. Umgebung. Med. 37, 1327–1341 (1995).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Grönland, S. Schätzung der der Bevölkerung zuzuordnenden Anteile aus angepassten Inzidenzverhältnissen und Expositionserhebungsdaten, mit einer Anwendung auf elektromagnetische Felder und Leukämie bei Kindern. Biometrie 57, 182–188 (2001).

Artikel MathSciNet CAS PubMed MATH Google Scholar

Chalidis, B., Sachinis, N., Assiotis, A., Maccauro, G. & Graziani, F. Stimulation der Knochenbildung und Frakturheilung mit gepulsten elektromagnetischen Feldern: Biologische Reaktionen und klinische Implikationen. Int. J. Immunopathol. Pharmakol. 24, 17–20 (2011).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Sun, LY et al. Wirkung eines gepulsten elektromagnetischen Feldes auf das Proliferations- und Differenzierungspotential von mesenchymalen Stammzellen des menschlichen Knochenmarks. Bioelectromagnetics 30, 251–260 (2009).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Massari, L., Caruso, G., Sollazzo, V. & Setti, S. Gepulste elektromagnetische Felder und gepulster Ultraschall niedriger Intensität im Knochengewebe. Klin. Fälle Bergmann. Knochenmetab. 6, 149 (2009).

PubMed Google Scholar

Liu, J. & Walmer, M. Wärmestabilität und Leistungsdaten für SmCo 2: 17 Hochtemperaturmagnete auf PPM-Fokussierungsstrukturen. IEEE Trans. Electron Devices 52, 899–902 (2005).

Artikel ADS CAS Google Scholar

Dürrschnabel, M. et al. Atomstruktur und Domänenwandfixierung in Permanentmagneten auf Samarium-Kobalt-Basis. Nat. Komm. 8, 1–7 (2017).

Artikel CAS Google Scholar

Marędziak, M., Marycz, K., Smieszek, A., Lewandowski, D. & Toker, NY Der Einfluss statischer Magnetfelder auf mesenchymale Stammzellen von Hunden und Pferden, die aus Fettgewebe stammen. In-vitro-Zelle. Entwickler Biol. 50, 562–571 (2014).

Artikel Google Scholar

Du, L., Fan, H., Miao, H., Zhao, G. & Hou, Y. Extrem niederfrequente Magnetfelder hemmen die Adipogenese menschlicher mesenchymaler Stammzellen. Bioelectromagnetics 35, 519–530 (2014).

Artikel PubMed CAS Google Scholar

Wiskirchen, J. et al. Menschliche fetale Lungenfibroblasten: In-vitro-Studie zur wiederholten Magnetfeldexposition bei 0,2, 1,0 und 1,5 T. Radiology 215, 858–862 (2000).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Miyakoshi, J. Die Übersicht über die zellulären Auswirkungen eines statischen Magnetfelds. Wissenschaft. Technol. Adv. Mater. 7, 305 (2006).

Artikel CAS Google Scholar

Marędziak, M., Tomaszewski, K., Polinceusz, P., Lewandowski, D. & Marycz, K. Statisches Magnetfeld erhöht die Lebensfähigkeit und Proliferationsrate von aus Fettgewebe stammenden mesenchymalen Stammzellen möglicherweise durch Aktivierung der Phosphoinositid-3-Kinase /Akt (PI3K/Akt)-Weg. Elektromagn. Biol. Med. 36, 45–54 (2017).

PubMed Google Scholar

Sadri, M., Abdolmaleki, P., Abrun, S., Beiki, B. & Samani, FS Wirkung des statischen Magnetfelds auf Zellausrichtung, Wachstum und Differenzierung in menschlichen, aus Nabelschnur gewonnenen mesenchymalen Stammzellen. Zelle. Mol. Bioeng. 10, 249–262 (2017).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Tsai, M.-T., Li, W.-J., Tuan, R.-S. & Chang, W.-H. Modulation der Osteogenese in menschlichen mesenchymalen Stammzellen durch spezifische gepulste elektromagnetische Feldstimulation. J. Orthop. Res. 9, 1169–1174 (2009).

Artikel Google Scholar

Ongaro, A. et al. Gepulste elektromagnetische Felder stimulieren die osteogene Differenzierung in mesenchymalen Stammzellen aus menschlichem Knochenmark und Fettgewebe. Bioelectromagnetics 6, 426–436 (2014).

Artikel CAS Google Scholar

Tu, C., Xiao, YF, Ma, YZ, Wu, H. & Song, M. Die Auswirkungen elektromagnetischer Felder auf die Selbsterneuerung mesenchymaler Stammzellen des Knochenmarks und das Potenzial für mehrfache Differenzierung. Stammzellres. Dort. 9, 215 (2018).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Jouni, FJ, Abdolmaleki, P. & Movahedin, M. Untersuchung der Wirkung eines statischen Magnetfelds von bis zu 15 mT auf die Lebensfähigkeit und Proliferationsrate von Knochenmarkstammzellen von Ratten. In-vitro-Zelle. Entwickler Biol. 49, 212–219 (2013).

Artikel Google Scholar

Muller, M. Zelluläre Seneszenz: Molekulare Mechanismen, In-vivo-Bedeutung und Redoxüberlegungen. Antioxid. Redoxsignal 11, 59–98. https://doi.org/10.1089/ars.2008.2104 (2009).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Rinaldi, S. et al. Seneszenz von Stammzellen: Auswirkungen der REAC-Technologie auf Telomerase-unabhängige und Telomerase-abhängige Signalwege. Wissenschaft. Rep. 4, 6373 (2014).

Artikel CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Chiou, S.-H. et al. Die Koexpression von Oct4 und Nanog verstärkt die Malignität beim Lungenadenokarzinom, indem sie krebsstammzellähnliche Eigenschaften und epithelial-mesenchymale Transdifferenzierung induziert. Krebs Res. 70, 10433–10444 (2010).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Wang, Q. et al. Die Tumorentwicklung von Subtypen der Gliom-intrinsischen Genexpression ist mit immunologischen Veränderungen in der Mikroumgebung verbunden. Krebszelle 32, 42–56 (2017).

Artikel PubMed PubMed Central CAS Google Scholar

Rasti, A. et al. Die Koexpression der Krebsstammzellmarker OCT4 und NANOG lässt auf eine schlechte Prognose bei Nierenzellkarzinomen schließen. Wissenschaft. Rep. 8, 1–11 (2018).

Artikel CAS Google Scholar

Guo, Y. et al. Expressionsprofil der mit embryonalen Stammzellen assoziierten Gene Oct4, Sox2 und Nanog in menschlichen Gliomen. Histopathology 59, 763–775 (2011).

Artikel PubMed Google Scholar

Tong, CK et al. Erzeugung mesenchymaler Stammzellen aus menschlichem Nabelschnurgewebe mithilfe einer kombinierten enzymatischen und mechanischen Dissoziationsmethode. Zellbiol. Int. 35, 221–226 (2011).

Artikel CAS PubMed Google Scholar

Referenzen herunterladen

Diese Forschung wurde durch die Zuschüsse des Fundamental Research Grant Scheme (FRGS) FRGS/2/2013/SKK01/UPNM/02/1, 0713 unterstützt. Die Autoren danken dem malaysischen Ministerium für Hochschulbildung (MOHE) voll und ganz für den genehmigten Fonds, der diese wichtige Forschung realisierbar und effektiv macht. Ein großes Dankeschön an die Stem Cell & Immunity Research Group, Immunology Laboratory, Department of Pathology, Faculty of Medicine and Health Sciences, University Putra Malaysia, Malaysia, Serdang für die Probenentnahme, den Einsatz der Geräte im Stem Cells Laboratory und ihr Fachwissen. Wir möchten auch dem Bibliothekar der National Defense University of Malaysia für seine Unterstützung bei der Materialbereitstellung danken.

Die Arbeit wurde vom malaysischen Ministerium für Hochschulbildung (MOHE) über die Zuschüsse des Fundamental Research Grant Scheme (FRGS) FRGS/2/2013/SKK01/UPNM/02/1, 0713 finanziert.

Abteilung für biologische künstliche Organe und regenerative Medizin, National Defense University of Malaysia, Sungai Besi Camp, 57000, Kuala Lumpur, Malaysia

Haslinda Abdul Hamid & Azizi Miskon

Stammzellen- und Immunitätsforschungsgruppe, Immunologielabor, Abteilung für Pathologie, Fakultät für Medizin und Gesundheitswissenschaften, Universität Putra Malaysia, 43400, Serdang, Malaysia

Rajesh Ramasamy

Fachbereich Physik, Fakultät für Angewandte Wissenschaften und Technologie, Universität Tun Hussein Onn Malaysia, Pagoh Campus, KM1, Jalan Panchor, Pagoh Higher Education Hub, 84600, Muar, Johor, Malaysia

Mohd Kamarulzaki Mustafa

Institute für Regenerative Medizin, Fakultät für fortgeschrittene Technologien in der Medizin, Iranische Universität für Medizinische Wissenschaften, Teheran, Iran

Vahid Hosseinpour Sarmadi

Zentrum für Zell- und Molekularforschung, Iranische Universität für Medizinische Wissenschaften, Teheran, Iran

Vahid Hosseinpour Sarmadi

Abteilung für Zahnradiologie, Fakultät für Zahnmedizin, Airlangga-Universität, Surabaya, 60132, Indonesien

Rajesh Ramasamy

Sie können diesen Autor auch in PubMed Google Scholar suchen

HAH hat die Experimente durchgeführt, Datenanalysen durchgeführt und Artikel durchsucht. HAH entwarf, schrieb und aktualisierte das Manuskript mit Unterstützung von AM, RR, VHS und MKMAM und MKM stellte den statischen SmCo5-Magneten des Systems her. AM, RR, VHS, MKM helfen bei der Betreuung des Projekts. AM hatte die ursprüngliche Idee.

Korrespondenz mit Azizi Miskon.

Die Autoren geben an, dass keine Interessenkonflikte bestehen.

Springer Nature bleibt neutral hinsichtlich der Zuständigkeitsansprüche in veröffentlichten Karten und institutionellen Zugehörigkeiten.

Open Access Dieser Artikel ist unter einer Creative Commons Attribution 4.0 International License lizenziert, die die Nutzung, Weitergabe, Anpassung, Verbreitung und Reproduktion in jedem Medium oder Format erlaubt, sofern Sie den/die Originalautor(en) und die Quelle angemessen angeben. Geben Sie einen Link zur Creative Commons-Lizenz an und geben Sie an, ob Änderungen vorgenommen wurden. Die Bilder oder anderes Material Dritter in diesem Artikel sind in der Creative Commons-Lizenz des Artikels enthalten, sofern in der Quellenangabe für das Material nichts anderes angegeben ist. Wenn Material nicht in der Creative-Commons-Lizenz des Artikels enthalten ist und Ihre beabsichtigte Nutzung nicht gesetzlich zulässig ist oder über die zulässige Nutzung hinausgeht, müssen Sie die Genehmigung direkt vom Urheberrechtsinhaber einholen. Um eine Kopie dieser Lizenz anzuzeigen, besuchen Sie http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

Nachdrucke und Genehmigungen

Hamid, HA, Ramasamy, R., Mustafa, MK et al. Die magnetische Exposition mit Samarium-Kobalt (SmCO5) erhöhte die Proliferation und Stammzellenbildung menschlicher mesenchymaler Nabelschnurstammzellen (hUC-MSCs). Sci Rep 12, 8904 (2022). https://doi.org/10.1038/s41598-022-12653-z

Zitat herunterladen

Eingegangen: 16. November 2021

Angenommen: 11. Mai 2022

Veröffentlicht: 26. Mai 2022

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-022-12653-z

Jeder, mit dem Sie den folgenden Link teilen, kann diesen Inhalt lesen:

Leider ist für diesen Artikel derzeit kein Link zum Teilen verfügbar.

Bereitgestellt von der Content-Sharing-Initiative Springer Nature SharedIt

Durch das Absenden eines Kommentars erklären Sie sich damit einverstanden, unsere Nutzungsbedingungen und Community-Richtlinien einzuhalten. Wenn Sie etwas als missbräuchlich empfinden oder etwas nicht unseren Bedingungen oder Richtlinien entspricht, kennzeichnen Sie es bitte als unangemessen.